买抗体ELISA试剂盒，到底该看什么指标？

说实话，我也踩过坑。

在那个时候, 刚刚开始接手实验室, 老板直接递给我一张采购单, 采购单上面写着“抗体ELISA试剂盒”, 看到这个之后, 我瞬间就傻眼了。什么是板子, 什么是酶标, 什么是封闭液等等, 所有这些对于我而言全都是陌生的词汇。我唯一所明白的仅仅是: 这物品似乎价钱特别贵。

之后使用了几回, 渐渐地就领会了, 它并非是什么玄之又玄的学问之道, 而是一组工具, 只是有的工具使用起来得心应手, 有的工具……着实会把人给气得火冒三丈, 怒不可遏, 暴跳如雷。

抗体ELISA试剂盒，到底该看什么指标？

老实讲, 好多人一上来就问“你这盒子的灵敏度究竟有多高”。这固然关键, 然而你可曾碰到过这样的情形——说明书里标明灵敏度是0.1 ng/mL, 可自己做出来的背景却高得好似刚洒上了墨水那般, 标准曲线高低起伏、歪歪斜斜, 甚至连一条比较规整的线性都呈现不出来?

其实啊，最该看的不是那个数字，而是那个数字怎么来的。

存在一些厂商, 其用于样品的是经过纯化处理之后的抗原, 而当换成交到你手中的血清、组织裂解液时, 便立刻显露出本来面目。故而呢, 在挑选抗体 ELISA 试剂盒之际, 要先询问一句: 你们对真实样本进行过检测吗? 是何种类型的样本? 有没有针对干扰物的测试?

别怕问，问了才不会被坑。

几个老技术员, 我就这个问题问过他们, 他们的回答, 出奇一致, 是: 多半是抗体本身出了问题。

用于抗体检测的ELISA试剂盒, 其关键核心所在便是那一对抗体, 即捕获抗体以及检测抗体, 这两者若配合良好, 所获取的数据便会较为可观, 可是细想一下, 一旦其中一个抗体是经由随意的杂交瘤方式制备而成, 或者其纯化过程并不彻底, 那么最终所呈现的结果必定难以稳定, 这是毫无疑问的。

此外还有一个细节, 那便是保存条件。你相不相信 , 同一个盒子 , 摆在4℃环境下与摆在-20℃环境下再拿出来 , 呈现出来的结果说不定就如同是两个全然纷异的世界。我曾目睹有人盒子送达后没急着使用 , 径直塞入冰箱深处 , 冷冻一周后再取出来使用 , 然而最终阳性对照竟然直接降至阴性水平。

这种事，说多了都是泪。

预算永远不够，这事我懂。

然而, 有些便宜的确是绝对不能去占的。比如说, 那种一盒售价为几十块钱的“通用型”抗体ELISA试剂盒, 它的价格确实是非常低廉的, 可是, 你所跑出来的数据, 你真的敢把它放置到论文里面去吗? 反正, 我是绝对不敢这么做的。

省预算的思路应当是, 挑选一个专门针对你目标抗原的, 不要贪多求全。有的盒子写明“适用于多种物种”, 听起来颇为厉害, 实际上常常是哪个都无法准确测出来。专一性, 乃是省钱的根本所在。

事实是另外存在着一种办法, 也就是直接去购置包被板子以及抗体自行进行配置。然而那属于进阶性质的操作，必须要有一点技术方面的基础才行。要是新手的话, 还是挑选一个口碑良好的品牌以整盒的形式去购买, 至少在出现问题的时候能够去找售后。

这个问题，我琢磨了很久。

之后察觉到了一种尤为简易的法子, 去查看它的封闭液构成成分。请勿发笑, 这的确算作一项硬性标准。

好些处于低端层级的盒子所使用的封闭液乃是将BSA与水进行混合调配而成, 倘若如此这般就能阻挡住非特异性结合, 那简直是毫无可能之事。稍微高端一些的盒子则会选用酪蛋白或者专门用于封闭的制剂, 如此一来跑出来的条带就会干净许多。

再有一个指标, 那便是酶标抗体的稀释倍数, 部分厂家为了节省成本, 其稀释倍数写得极为高, 然而实际上活性并不够, 最终的结果便是显色特别浅, OD值无论如何也上不去。

要是你确实真真切切不晓得技术方面的情况, 那就来看这么一件事情: 这个盒子售卖了多少年的时间。售卖超过五年时长的, 基本上是不会差劲儿的。实验室里面的人可不是那些头脑愚笨的人, 不好用的产品早就已经被淘汰掉了。

挑选抗体ELISA试剂盒这件事, 并非那般神秘莫测。只需留意这三点: 抗体的状况是否良好, 封闭的程度是否够硬, 样本测试的结果是否真实。若这三个方面都能够得以满足, 那么基本上就稳当了。

别被那些花哨繁杂的参数蒙蔽了眼睛, 数据是通过实际操作做出来的, 而不是靠吹嘘得来的。

反正当下, 我去买盒子的时候, 会先瞅瞅评价里头有没有人去张贴原始数据, 那些有图的情况, 我才敢去下单, 在如今这个年头, 真诚的厂家数量不多, 一旦遇上了那就好好珍惜。