实验室里待久了，你会发现一个奇怪的现象。
从事细胞实验的师兄, 还有师姐, 最开始的时候, 全都采用各种各样的商品化细胞系, 养着养着, 便开始着手折腾原代细胞。在折腾原代细胞的这群人当中, 又存在着相当一部分人, 最终都将目光投向了猪。
不是小鼠，不是大鼠，是猪。
刚开始的时候, 我也并不理解, 猪, 总是感觉距离人类挺遥远的。然而后来, 听一位从事肝细胞研究的朋友进行吐槽, 他讲, 他先前运用人肝癌细胞系HepG2开展实验, 所跑出的数据好看得不得了, 可是在投稿文章时, 审稿人一句话就将其怼了回来——”你这个细胞系同真实的人体环境相差得忒远了, 可不可以使用原代细胞去验证一下? “。
彼时, 他瞬间陷入懵懂状态, 于整个实验室范围内四处寻觅原代人肝细胞此举, 然而却发觉, 要么是根本无法购得, 要么是价格高昂到超乎想象, 并且不同批次之间所存在的差距极大, 大到足以令人陷入极度崩溃的境地。
后来他试了猪原代肝细胞。
然后一发不可收拾。
为啥偏偏是猪？
说起来其实很简单。
猪的生理结构与人类极为相像, 并非那种仅在外观上呈现出的表面相似, 而是其内脏结构, 以及代谢途径, 甚至免疫系统的响应模式, 相比小鼠和狗而言, 都更趋近于人类。
若你于网络之上搜索“猪原代细胞”, 所呈现出来的诸多文章, 其研究方向多种多样, 包含关乎心脏者, 涉及肝脏者, 涉及肾脏者, 涉及皮肤者, 涉及胰岛者等等领域——几乎涵盖人体能够涉及到的各个器官, 猪皆具备与之相对应的细胞模型。
并且猪的身形庞大, 所能够获取到的组织数量远比小鼠多得多。你养殖一百只小鼠才能够获取到如同那么一点点的心肌细胞, 而一头猪就能够帮你搞定。其实验的重复性更是理想、很好, 再也不需要成天整天地担忧样本数量不足。
但原代细胞这东西，真的不好搞
说实话，我做实验最怕的就是原代细胞。
并非讲它不好, 而是它实在过于娇贵了。那批你从组织里才分离出来的细胞, 处在最佳状态, 然而稍有操作失误或者培育条件不合适, 它就会对你有所不满！
贴壁贴不好，增殖慢，传两代就开始老化。
因此不少人在购置猪原代细胞之际, 最为忧心的便是具备两个问题, 其一, 细胞活性究竟是否具备可行度? 其二, 在自己将其购买到手之后能否实现养活操作?
这两个问题，几乎每天都在各种实验群里被翻来覆去地问。
“你们家的猪原代肝细胞贴壁率咋样？”
“复苏之后能活多少？”
“传代能撑到第几代？”
问的人多起来了, 我渐渐地就懂得了, 并非众人不想运用猪原代细胞, 而是担忧购置到手的物品不可靠, 钱耗费了, 时间也耗费了, 最终数据却无法使用。
大家都在等一个“确定性”
做实验的人，最需要的就是确定性。
有的试剂价格能高些, 然而呢其批次得始终保持稳定。有一些细胞养起来会比较费劲, 不过说明书里所标明的活性数据绝对要是如实的。
有那么些人, 为了去购置一批称得上靠谱的猪原代细胞, 将市面上能够搜索到的供应商全都进行了一番尝试, 历经周折后, 最终才确定锁定了那么一两家。询问那人为何要这般折腾, 他讲: “先前曾买到过一批明明活性标注得十分高, 然而实际复苏的时候却死掉了一半的, 自那以后我便只相信自己亲自试过的。”。
这是一个行业里普遍存在的信任痛点。
用户并非没想买的意愿, 是没有那份无所顾虑去买的胆敢, 只因只要出现了细胞质量状况有缺陷的情形, 后续所有与之有关的实验就都得全部推翻重新开展, 而对于那些身为硕士学历或者博士学历的人来讲, 这样的时间耗费成本完全是他们所承受不起的。
猪原代细胞到底能做啥？
简单列几个方向，你就知道它为什么火了。
将猪原代肝细胞用于药物代谢以及药物的毒性评价, 因为猪和人的药物代谢通路相似度较高, 所以这样得出的数据会更具参考价值, 这可比运用大鼠细胞转人的CYP酶来加以模拟要靠谱许多, 这种情况就是药物毒性测试。
猪原代皮肤成纤维细胞被广泛用于创伤愈合以及皮肤替代物研究里, 这种运用是因猪的皮肤结构与人类极为相近, 而这属于组织工程和再生医学范畴。
致力于心血管方面的研究, 猪的心脏大小, 与冠脉分布情况, 和人类几乎呈现一样的状态, 猪原代心肌细胞, 乃是研究心肌缺血再灌注损伤的称作金标准的模型。
将猪的胰岛进行移植, 猪所产生的胰岛素与人类生成的胰岛素相比, 仅仅只差一个氨基酸, 猪的原代胰岛细胞, 一直以来都是异种移植研究领域里备受关注的热点。
坦白讲, 从基础的科研范畴, 到转化医学领域, 猪的原代细胞差不多涵盖了所有你所能想到的方向。
所以买猪原代细胞，到底该注意啥？
查看分离的时间, 原来是代细胞从组织那儿进行分离, 一直到发货, 这个时间, 是越短越好, 要是超过了48小时的话, 基本上, 就能够放弃了。
查看其纯度。众多供应者所标称标记的“猪原代心肌细胞”, 其中极有可能混杂涵盖了数量众多的成纤维细胞。要是你不去实施进行纯化这一操作行为的话语呀, 那么实验最终所呈现出来的结果根本就全然没有办法讲清楚说明白究竟是属于心肌细胞所对应的观测数据还是成纤维细胞所对应的参照数据。
观察验证所得数据, 是否开展了免疫荧光鉴定, 是否进行了功能验证, 不能仅仅着眼于活性数字。
观察售后情况, 此刻这一要点极易被忽视, 要是细胞养死了该如何处理, 供应商是否会进行负责, 有没有技术支持来协助排查问题?
众多人初次购买猪原代细胞, 皆是在缴付学费之后才领悟这些坑的。
其实做科研这件事，就是个不断试错的过程
唯有你使用过质量欠佳的细胞, 方可明晰优质细胞的具体模样。只有你遭受过供应商的欺诈, 才会于下一回下单之前, 将所有细节询问明白。
存在着猪原代细胞这么个事物, 若讲它难, 好像也并非特别难, 可若说它简单, 似乎又并非那般简单。而其中的关键之处在于, 你是不是能够寻觅到稳定且可靠的来源。
若从起始之时便能够获取到, 批次具备稳定性, 活性处于较高水准, 纯度也为较高程度, 且售后存有保障的细胞, 那么后续的实验将会顺畅许多。
至少不会因为细胞的问题，白白浪费半年时间。
来到最后要讲些实际的内容了——要是你正处于思量着运用猪原代细胞去开展实验的这种状况, 切不可仅仅只关注价格这一方面。那些价格较为低廉的物品通常情况下反而是最为昂贵的, 原因在于你的时间在价值方面要比那少许的差价珍贵许多得多。
挑选供应商之际, 多去询问一下其细胞分离工艺, 多留意查看一下其鉴定数据, 多向他人打听一番口碑, 均勿错过。
找到一家靠谱的，后面就省心了。
