说实话，刚接触上皮细胞培养那会儿，我真是一头雾水。
存在着好些培养基, 像是基础培养基、血清、添加剂等等, 瞅着说明书里那密密麻麻的成分表, 脑袋就嗡嗡作响。 在那个时候心里就琢磨, 是不是有那么一种物品, 拿过来便能够使用, 无需自己这儿找一点那儿凑一点?
之后晓得了, 确实存在着, 那便是上皮细胞完全培养基。
什么是上皮细胞完全培养基？
说白了，就是个“懒人包”。
米饭是基础培养基, 菜是血清, 调料是生长因子。完全培养基是什么呢, 就是把这些全部给你配制好了, 你直接进行加热就能够吃。
可是问题出现了, 市场当中的完全培养基种类繁多, 价格处于几十到几百的不同区间, 究竟它们之间的差别是怎样的呢?
便宜的和贵的，差在哪？
我之前试过一款贼便宜的，包装挺好看，价格低得让人心动。
那么结果究竟如何呢? 细胞呈现出好似没进食过的状态, 隔三岔五就漂浮起来, 最终整瓶被倒掉, 这不仅白白耗费了时间, 而且还投入了一批极为珍贵的原代细胞。
随后, 更换了一个有着良好口碑的品牌, 其价格比之前贵了一倍, 然而, 细胞的状态, 能够用肉眼明显地察觉到优于之前了。
贵，往往贵在：
血清的源自何处与批次的稳定状况, 优质的血清, 每一批均经过检测, 不会出现这周养殖情形良好, 下周即刻便失效的状况。
将因子的纯度予以添加, 存在一些价格较为低廉的培养基, 其采用工业级原料, 而细胞对于这种配置根本不理睬。
所具备的无菌保证情况, 完全培养基在开封之后具体能够使用的时长, 这与生产工艺之间的关联是极为显著的, 很有关系。
怎么判断培养基适不适合你的细胞？
这个问题，真的没有标准答案。
不同源头的上皮细胞, 脾性存在差异。小鼠的上皮细胞如此, 人的上皮细胞如此, 猪的上皮细胞亦如此……甚至同一物种由不同组织而来的上皮细胞, 所需亦是各不相同。
我自己的经验是：
一开始去查看说明书, 它是不是明确地写出“适用于某某上皮细胞”这方面的内容。要是其表述属于“广泛适用”这种情况, 那么通常来讲就意味着它很有可能在各个方面都存在不够好的状况。
向同行再次询问, 同一个实验室里且是师兄师姐身份的他们, 所使用的牌子曾遭遇的坑, 比起仔细阅览过一百篇广告还要更具价值。
最后, 先小小尝试一番。千万别刚一开始就去买大瓶的, 得先去买小包装的, 试用个几天看看, 瞧瞧细胞的形态如何, 再看看贴壁的状况怎样, 还要留意增殖的速度快慢情形。
上皮细胞完全培养基里，到底都有啥？
你也许曾感到好奇, 那些在配方之中所书写的“proprietary blend”（专利配方）究竟是什么东西呢?
实话告诉你，没人知道。
但通常来说，核心组件就那几样：
基础培养基, 一般而言是 DMEM, 或是 F12, 又或者是它们二者的混合搭配液体。
胎牛血清, 其比例在百分之二至百分之十之间有多有少, 存在差异, 部分低血清配方的比例甚至低于百分之一。
生长因子, 其中EGF也就是表皮生长因子当属标配, 部分情况中, 还会添加FGF, 还有胰岛素, 以及氢化可的松。
抗生素, 存在有的添加的情况, 而有的不添加。于我个人而言, 更倾向去购买那种不添加抗生素的, 具体如何购买, 你自行拿主意。
其他辅助成分：比如转铁蛋白、硒、乙醇胺
看到这里你可能会问：那我能不能自己配？
是能够做到的, 然而会极其繁琐。并且自行配置的批次, 其稳定性难以得到确保, 细胞培养极为忌讳的便是那种“此次可行, 下次却不行”的状况。
真的有必要买那么贵的吗？
这个问题，我跟好几个同行争论过。
有的人觉得，细胞养得糙一点也能活，何必花那个冤枉钱。
但是, 我倒是更加倾向于这样一种说法, 那就是针对你目前的每一分投入而言, 它都是在给实验结果去上上保险。
你仔细去想, 一个实验周期动不动就是几周, 甚至长达几个月呢, 倘若只因培养基不合适致使细胞状态欠佳, 数据出现大幅波动, 最终还遭到审稿人的质疑, 那种挫败的感觉, 可比花几百块钱去买一瓶质量好的培养基要难受得多了。
当然，也不是越贵越好。
有些拥有大牌子的被称作培养基的物品, 其价格贵到了那种离谱的地步, 只是成分事实上并没有带有特别惊艳之感。相比较而言有着某些二线相关品牌推出的产品, 在性价比方面呈现很高超出常人想象程度, 我所用于培养原代细胞所持续选用的一直是这里面其中的某一个品牌, 细胞一直以来所呈现的状态始终是保持稳定状态的。
用完全培养基，还需要额外加东西吗？
这个要看情况。
存在一些宣称“即用型”的完全培养基, 然而在实际运用当中, 你或许依旧需要依照自身的细胞使之得以调整。
譬如我所饲养的一种具备特殊性质的上皮细胞, 在购得的全然培养基之中, 表皮生长因子的浓度处于偏低的状况, 于是我额外增添了些许, 其效果迅速且显著地显现出来。
另外, 细胞密度同样是相当关键的。同样的那种培养基, 要是你接种得稀疏了, 细胞生长状况就会欠佳；要是接种得过于密集了, 又极易出现老化现象。而这些细节, 说明书是不会向你告知的。
保存和解冻，也有讲究
很多人买了完全培养基，往4°C一丢，一放就是大半年。
其实，完全培养基的保质期没那么长。
没开封的：按说明书，一般4°C下保存6-12个月
开封后：最好1-2个月内用完
解冻后：不要反复冻融，分装成小份用
还有, 在使用之前, 务必要使温度达到平衡状态。要是刚从冰箱拿出来就直接将其倒入培养皿, 细胞会受到“惊吓”。
那到底怎么选？
我没办法给你一个牌子。
但我可以给你几个标准，照着筛，大概率不会踩雷：
1. 探血清之源地为何处——于南美、澳洲、北美, 其产地各不相同, 质量亦存在差异。
2. 瞧一瞧添加因子的种类, 瞅一瞅添加因子的浓度, 这究竟是不是明确地进行了书写, 又或者是表述得含含糊糊的?
3. 瞧瞧那被推荐的细胞类型, 要是它胆敢写上“适用于A549、HaCaT 、Caco - 2”这般具体的细胞系, 那起码是存在实验依据的。
4. 瞧用户给出的评价 , 并非仅仅去看那些好评 , 关键在于查看差评当中 , 是不是存在诸如 “细胞不长 ” 、 “污染 ” 这般的关键词。
5. 瞅售后情况, 有些厂家会给出能让客户先试用的免费装, 如此, 顾客就能先体验一番之后, 再做出购买的决定, 这般做法是最为可靠稳当妥当、令人安心放心顺心、毫无后顾之忧的。
最后说几句大实话
我踩过太多坑了。
起始养细胞的那一期间, 因贪图价格低廉而购置了不知名的培养基, 然而细胞却未贴壁, 最终整瓶都被倒掉。之后过分迷信大品牌, 购买了数量众多贵到离谱的, 可不料却发觉其与价格便宜的那款效果几乎一样。
现在学乖了：
培养基这东西，适合自己的才是最好的。
参考他人的推荐是可行的, 然而却不能全然相信。各个实验室存在着环境方面的差异, 操作习惯也不尽相同, 所使用的血清批次亦是不一样的, 最终终究要凭借你亲自去尝试。
别怕麻烦。
培养细胞这事, 向来是那种既得具备耐心又得拥有细心的事体, 挑选培养基, 仅仅只是此进程路径上的一道关卡罢了。
以较为乐的视角考量, 等到你寻觅抵达那款适配的上皮细胞完全培养基, 观察之际, 细胞逐日拓展萌生, 呈现出美观的形态, 且增殖态势稳固, 那种源自内心的成就之感, 较之于其余任何事物, 都更具价值。
