说实话,干过几年细胞实验的人,十有八九都嫌原代细胞麻烦。
刚买回来便显得娇弱易坏, 仅仅养了两天就迅速老化, 历经几代传承就出现变形状况, 全然比不上直接采用细胞系, 那样既省心又省力, 能够随心所欲地进行传代操作, 不管想要冻存多长时间都可以。
我以前也这么想。
直至有一回, 我运用某个经典细胞系历经半年跑出数据, 打算发表文章之际, 隔壁实验室的老教授途经看了一下, 顺口询问了一番: 你所用的这个细胞, 是从哪一户购置的? 传了多少回代了?
我当时愣了。
于是, 我返回去进行一番查询, 那个细胞系, 它在全球诸多、好多实验室里, 被反复地进行传代操作, 历经了几十年的时间, 其基因组内部,早已满满当当地堆积了大量的突变, 甚至, 连染色体的数目都已然出现了差错, 不再正确了。
可它还在被叫做“某某细胞”。
在那一个瞬间那一刻, 我猛地忽然间觉得, 我耗尽耗费了半年的时间时段, 以及几万块的金钱钱财, 居然仅仅只是养了个算得上是什么都难以确切定义的玩意儿东西呢。
原代细胞到底是个啥?
说白了,就是从活体组织里直接分离出来的细胞。
即便是小鼠的肝脏、肾脏、肺部、脑部以及血管内皮等各个部位, 只要其取材是新鲜的, 未曾经过人为改造, 也没有在培养皿当中传过数十代, 这样的都被算作是原代。
它们身上携带着完整的信号通路, 它们留存着真实的基因表达模式, 它们知晓“我是谁”。
而细胞系呢?
如同一只被投放在马戏团之中饲养了数十载的老虎, 早就已然忘却了该如何去进行捕猎, 仅仅只会站立起来作揖从而讨要吃食的。
为什么你的实验总重复不出来?
这个问题我问过自己无数次。
本来是完全相同的操作, 完全相同的试剂, 完全相同的培养条件, 然而这次呈现这个结果, 下次呈现那个结果, 致使自己都陷入对人生的怀疑之中。
后来发现,八成是细胞的问题。
长期传代时的细胞系, 会渐渐地出现基因漂移现象。你今日所使用的这个批次, 跟上个月所使用的那个批次相比, 极有可能已然不再属于同一个“物种”。它们仅仅是外在看起来相像, 然而内在实际上已然发生了改变。
原代细胞就不一样。
它们是从同一个动物的体内给取出来的, 其基因背景是一致的, 细胞状态同样是一致的, 就连代谢活性也是一致的。你下一次所做的实验, 只要能够保证小鼠的品系是相同的, 日龄是相同的, 组织部位也是相同的, 那么所出来的细胞基本上是不会存在批次差异的。
这才是真正的“可重复性”。
别只看成本,要算总账
我知道,原代细胞贵。
进行一回实验, 光是购买小鼠, 就得花费几十甚至上百, 再把试剂耗材投入、分离所耗费的时间、培养产生的成本加起来, 核算下来, 比购买细胞系要贵上好几倍呢。
但你有没有算过另一笔账?
您拿着细胞系进行了为期三个月的实验, 数据方才得出, 然而审稿人却要求您更换一个系统重新展开复核工作。您无奈之下只能硬着头皮去补做实验, 这又耗费了三个月的时间, 最终却发觉两次所获取的结果并不相符, 无奈之下只好一切从头开始再来一遍。
半年时间,废了。
不过原代细胞所具备的数据, 绝大多数的审稿人员都难以提出异议。毕竟它自身的生理相关性就在那儿存在着, 任何一个人都没办法从中找出问题来。
一次过,就是最大的省钱。
它真的很难养吗?
实话说,比细胞系难一点,但没你想的那么夸张。
紧要的是两件事情, 其一, 取材得迅速, 从处死小鼠开始算起到分离细胞这个阶段, 时间拖延得越长久, 存活的细胞数量就越少;其二, 培养基得合适, 不同组织源的细胞, 对于营养因子以及基质的需求全然不一样。
只要你把这两件事做好了,原代细胞其实没那么娇气。
它只是需要一个更干净、更稳定的环境,仅此而已。
最后说句掏心窝子的
我这几年,越来越佩服那些死磕原代细胞的实验室。
他们做的实验量不大,但每批数据都扎实,经得起推敲。
然而, 那些使用细胞系的人, 常常会批量地去制造数据, 这些数据乍一看显得十分好看, 然而却经受不住进一步的追问。
做科研这件事,有时候就是选择。
你可以选择简单,也可以选择真实。
养小鼠原代细胞, 这一路径, 着实耗费钱财, 也花费时间, 然而它起码能让你明白, 你手中所握持的, 并非一件假冒伪劣的赝品。