养细胞这活儿，说多了都是泪。
我仍记着首次养原代细胞时的情景, 当时那叫一个慌乱无措。凌晨三点之际, 实验室走廊的灯呈现出忽明忽暗的状态, 我注视着培养箱里那瓶尚未贴壁的细胞, 此时我的心跳比离心机运转时发出的声音还要响亮。隔壁的师兄讲道, 你这般实际上就是在拿命去赌, 赌的就是这批细胞能够挺过三天的时间。
结果呢？三天后，细胞全飘了。
漂浮的细胞，就像你投出去的简历，石沉大海，无影无踪。
后来, 我才弄明白, 为啥那些老教授, 那些能发表高分文章的大佬, 手上总会有一批“神秘”的原代细胞库存。并非是他们运气佳, 而是他们早就洞悉了一个真相, 那就是原代细胞这玩意儿, 在买回来的那个瞬间, 战斗便已然开启了。
为什么你买的原代细胞总养不活？
问题不出在你手上，是你买的东西本身就带坑。
好多实验室因贪图便宜, 而去购买那种来源不知去向、传代次数多得难以计数的细胞。当你把它拿回来瞅一眼, 状态貌似还可以, 然而到了第二天它就开始出现状况。到了第三天它干脆给你来一场集体覆灭。你会觉得难道是自己配制培养基出了差错? 血清的批次存在问题? 还是被污染了呢?
不是的。
现实之中真正的缘由在于, 市面上存在着数量众多的原代细胞, 这些原代细胞在出厂之前便已然被“过度使用”了。细胞于体外每额外传代一次, 其基因表达便会出现一次偏离。你所拿到手的细胞, 极有可能早就并非是其原本应有的生理状态了。如此一来, 你所开展的实验, 从起始点便是错误的。
口碑好的原代细胞供应商到底怎么选？
别信广告，信背书。
朋友圈内被捧上了天的, 先别急着去下单。真正靠得住的供应商, 不会对你说些什么“独家技术”、“神秘配方”之类的话语。他们会直接向你展示数据, 有能够细胞鉴定之报告, 有纯度检测之结果, 有功能验证之情形, 甚至能告知你这批细胞的供体相关信息, 比如年龄、性别、还有组织来源, 都明明白白、清清楚楚。
另外, 瞧瞧他们有没有胆量承诺“保证存活” , 敢于把细胞存活比率写进合同当中的, 起码表明人家对于自身的品质把控是实实在在拥有信心的。在描述方面含混不清的, 你自然是明白的。
买回来的原代细胞怎么处理才能多用几天？
这个问题问得好，问到了点子上。
好多人拿到细胞, 满心想着马上铺板去做实验。先别急。要先让细胞在瓶子里“歇”上两个小时。得让它适应适应环境, 从运输带来的应激状态缓缓缓过来。就如同你坐了一整天绿皮火车，下车后先抽根烟喘喘气那般。
进行换液操作, 然而并非全部更换, 保留一半原有的老培养基, 添加一半新鲜的培养基, 如此这般细胞便不会由于环境发生急剧变化而出现休克现象, 待其完全贴附于培养容器壁上并伸展舒张开来后, 再逐步进行替换操作。
有一种奇特的做法, 我平时通常不会告知他人——在收到细胞之后, 立刻马上冻存一部分。不要心存不舍, 原代细胞这类事物, 批次间的差异大得能让你对人生产生怀疑。属于同一批次的, 将其保存起来就是给自身留下后路。你永远都不会晓得下一批次是否会出现问题。
原代细胞和传代细胞系到底差在哪？
细胞系若要发生传代, 如同流水线上的零件一般, 具备标准、稳定以及低成本之特性。然而其存在的问题, 即为显得尤为过于标准了。这样的细胞系已在体外历经了数百次传代增殖, 致使自身全然忘却了原本生长于人体的哪一个器官之中。你运用此细胞系所开展的实验, 最终所获取的结果, 潜在的可能性仅仅是只能够表明“该细胞系所呈现出的具体反应情况”, 而绝非是“人体细胞真实呈现出的反应状况”。
原代细胞有所不同, 它才刚从组织当中出来, 尚且携带着身体的“记忆”, 它的基因表达, 它的代谢模式, 它的信号通路, 皆是更加接近于真实生理状态, 这同样是为何当下顶级期刊越发不看好仅仅只用细胞系的文章的缘由, ——审稿人会这般说, 你所得到的这一结果, 在体内能够进行重复吗?
然而原代细胞却是有其特性的, 它十分娇贵, 难以妥善伺候, 存在着批次不同所导致的较大差异, 并且价格颇为昂贵。你用金钱所购买来的并非仅仅只是一瓶细胞, 而是一颗犹如定时炸弹般存在的物品, 同时也是一把能够开启真实生物学世界的关键钥匙。
原代细胞能放多久？最佳使用时间是什么时候？
越快越好。
于拿到手之时起的24小时范围以内, 此为黄金窗口, 可是一旦超出了三天这个时间段, 细胞便会开始呈现出“衰老”的状态, 其增殖能力会出现下降的情况, 并且表型也会开始产生漂移现象, 你在第五天所开展的实验以及第一天所进行的实验, 极有可能得出全然相反的结论。
别舍不得用。养着养着，细胞就老了，老到连它妈都不认识它。
我见识过最为厉害的操作, 有人购入了一批肝细胞, 在当天就分裂成了十几份, 分别开展不同处理, 在48小时以内全部进行收样, 数据好到简直不得了。这般便是高手, 出手既迅速又精准。
说到底，原代细胞这玩意儿，就是个快消品
别想着买回来当传家宝。
别为省那几百块钱买次品，浪费时间浪费感情。
也别买回来不舍得用，放着放着就废了。
养细胞之事, 这所养的, 乃是一种心态, 所养的, 又是一份耐心, 所养的还有那对数据负责的、极具较真意味的特别劲儿。
现今, 每当我开启培养箱, 望向那些贴壁状况佳且形态舒展的原代细胞, 内心便觉安稳 , 因它们向我传达, 后续的实验数据是可靠的。
有那么一些新手们, 他们还正为细胞养不活这个事儿而急得抓耳挠腮, 对此我只能讲——那就再多试上几次, 等到你买到了一批确实真正靠谱的原代细胞, 那时你就会发觉, 原来并不是你的问题, 而是你一直以来都没有选对。
