说真的，做实验选试剂盒这事儿，有时候比写论文还让人头大。
特别是小鼠ELISA试剂盒, 在市面上存在着众多花花绿绿的牌子, 其参数表被写得繁杂不堪, 价格范围涵盖了从几百到几千不等。倘若你仅仅只是盯着价钱去看, 那么十有八九是会陷入到踩坑的境地的。
我存在一位友人, 前些日子贪图便宜购置了一个所谓“性价比超高”的试剂盒, 然而做出来的标准曲线如同心电图模样, 歪歪扭扭的。其样本重复性能差到了离谱的程度, 同一孔位的吸光度竟然相差两倍之多。最终数据不敢采用, 实验就等同于白做了, 时间也白白耗费了, 样本同样被浪费掉了。他愤怒得差点将板子给摔了。
所以，到底怎么选？我跟你聊聊。
灵敏度是不是越高越好？
不一定。
许多人一开始便发问“你这个试剂盒灵敏度究竟是多少？”好似数值愈来愈小就愈发厉害。然而你可曾思索过, 你所检测的样本之中目标蛋白浓度是否高呢?
要是你的样本浓度自身就处于较低水平, 好像脑脊液、细胞上清被稀释了众多倍的情况, 那的确是需要具备高灵敏度的。然而要是你所检测的是血清、血浆这类浓度相对较高的, 灵敏度过高的检测盒子反倒会令你变得很忙乱。样本需要被稀释程度好多倍, 一旦稀释倍数增大, 误差也顺带被放大, 最终计算得出的浓度或许会和真实数值相差一大段距离。
你需要弄明白自身归属的样本类别, 不存在那种“放之四海皆准”的盒子, 仅存在“适配得当”的盒子。
特异性靠谱吗？交叉反应有多严重
这问题很多人会忽略，直到被坑过才后悔。
小鼠所拥有的细胞因子、蛋白, 与大鼠、人的部分存在着较高的同源性。倘若你所购置的盒子抗体缺乏足够的特异性, 那么它极有可能不止抓取你所期望的蛋白, 还会顺带将其他的蛋白也一并抓住。如此一来, 你所检测出的浓度便会出现虚高的情况, 进而还误以为自己发觉了某种重大的现象。
获取到试剂盒说明书之后, 先去察看“交叉反应”那一项内容。要是其表述为“无交叉反应”, 内心同样得打上一个疑问符号。最为妥当的办法是向技术支撑方面进行询问, 或者去寻觅那些之前使用过的人展开打听情况一番。
操作步骤烦不烦？时间成本也是成本
有些试剂盒的步骤多得令人胆寒, 洗板需要洗5次, 而且每次都还要浸泡2分钟, 孵育动不动就要过夜, 整个流程操作下来, 两天的时间里都完成不了。
倘若你仅仅制作几块板, 那倒也罢了。要是进行大批量制作, 有几百个样本, 操作的繁琐程度会直接决定你加班的时长。当第二天眼皮开始打架的时候, 你很有可能将会后悔当初为何没有选择一个操作简洁的。
翻阅一下说明书之中所呈现的流程, 于内心之中展开时间的计算。切莫仅仅着眼于检测范围、灵敏度这类硬性指标, 操作时的便利性同样是实实在在的价值所在: 。
稳定性如何？批次差异大不大
这可能是最让人头疼的问题。
你采购回一批试剂盒, 将那些实验给做完了, 过了两个月想要补几个数据, 又去购买同一家的同一款试剂盒, 然而却发现当时标准曲线发生了变化, OD值跟之前的变得不一样了, 这就被称作批次间差异。
具较大影响力的品牌一般管控状况更优些, 可也切莫盲目地迷信。最为稳妥的举措是: 要是实验的周期较为漫长, 一次性将所需的数量购置齐全。不要在今日购买一盒, 而在明日又去购买一盒。否则最终把数据拼凑在一起时, 连你自身都不清楚该如何去阐释那些差异。
售后服务？真出问题你就知道了
平日觉着售后没什么大不了, 等试剂盒出现状况了, 你把邮件发送过去, 连续三天都无人回复。拨打客服电话过去, 客服告诉你得去找技术支持, 而技术支持又让你去找销售, 销售却讲这事儿不归他负责。你的实验正等着要出结果, 急得如同热锅上的蚂蚁般团团转。
在购买之前, 要去问个明白, 问清楚万一出现了问题, 那退换货的流程究竟是什么样的, 还要问技术支撑的响应速度是不是够快, 另外还要问有没有中文的技术支撑, 可千万不要小瞧了这些方面, 因为在关键的时刻它们是能够救你一命的。
最后说句掏心窝子的。
在挑选试剂盒这件事当中, 往根底里讲, 实际上就是一个存在着“适应”情况的进程。要适应你的样品类别, 要适应你的试验规模, 要适应你的时间规划考量, 要适应你的售后服务方面的需求状况。价格仅仅是其中的一项要素, 可不要让它变成了唯一的有着决定作用的考量点。
实验进行得是否顺利, 在不少时候取决于你前期选择是否正确, 莫等板子运行完毕才发觉问题, 届时就已然晚了。
希望你能选到称心的盒子，数据漂亮，文章顺利。
