你被试剂盒坑过吗？
讲真的, 在实验室当中, 最让人烦的是, 购买了那种抗体ELISA试剂盒, 一番折腾, 最终结果却没能显现出来。
要么背景升高到了极其夸张的程度, 要么灵敏度降低到了非常可怜的地步, 标准曲线绘制出来呈现出类似抛物线的形状, 老板看到之后脸色都发生了变化。
我存在友人, 进行ELISA操作直至半夜两点, 最终发觉竟是试剂盒自身存在疑难。在那一瞬间, 着实萌生出将整盒物品抛向窗外的念头。
因而, 对于选择抗体 ELISA 试剂盒这件事情而言, 绝对不可以单单只是着眼于价格这一方面, 同样也不可以仅仅只是关注牌子这一因素。
得看核心。
你的样品和抗体搭吗？
有好多人一上来就发问, 这个盒子里头的抗体源自何处, 是兔子的吗, 是小鼠的吗, 是单克隆抗体还是多克隆抗体?
问得没有差错然而常常忽视了最为根本的事物, 那就是你的样品究竟是什么, 至于抗原和这笔抗体到底会不会结合。
比如说, 你所进行制作的对象为人血清, 然而其中的抗体却是针对重组蛋白而专门设计的, 那么极有可能检测得出的信号与真实的值之间相差一段距离。
别问我怎么知道的，我也踩过坑。
更为关键的是交叉反应。有时, 你所要检测的靶标与另一蛋白序列极为相似, 然而试剂盒却全然分辨不清, 最终得出的数据仅仅能够用以欺瞒审稿人, 而无法实际用于发表文章。
所以, 挑选抗体ELISA试剂盒以前, 务必得先瞧瞧它的交叉反应评估数据。包装上即便写得花里胡哨没有用, 关键是得看有无正经的数据来支撑。
灵敏度够用吗？
这个事儿真的，太关键了。
存在一些试剂盒宣称其检测下限为1 pg/mL, 听讲起来挺厉害, 是不是啊? 可是当你在实际使用期间, 发觉该标准曲线的最低点均无法跑成直线。
有的试剂盒, 其背景之高, 简直难以想象, 空白孔的吸光值, 竟然超过了 0.5, 如此这般, 又该如何去测定低浓度的样品呢?
我的提议这样子, 不要仅是瞧厂家所给予的参数, 最为理想是寻觅有着使用经历的人去打听打听, 或者自身先开展一次预期的实验瞧瞧。
特别是你所进行操作的是细胞上清, 或者是组织裂解液, 这一类的样品其本身的背景就是偏高的, 对于试剂盒的要求会更加严格。
有没有那种自带封闭优化、背景控制出色的盒？有，但得自己挑。
操作是不是反人类？
我记着首次运用某知名品牌的试剂盒, 说明书一经翻开, 便是密密麻麻的字词, 有着三步预处理, 还有两次孵育, 更含有三次洗涤, 且还着重指出每个步骤都得精准控制时间。
你所在的实验室当中, 仅有一个恒温箱, 它已被其他人的实验排满, 于是, 你只能端着板子, 站在水浴锅的旁边, 静静等待。
谁受得了？
此刻存在着诸多的抗体 ELISA 试剂盒, 它们已然被优化成为一步法, 或者是两步法, 整个过程仅仅需要两三个小时。
然而我依旧提议你瞧一瞧说明书, 不要仅仅贪图便宜。存在一些操作较为简易的盒, 实际上是借助牺牲灵敏度给换取来的, 你得进行权衡。
价格和稳定性，哪个更重要？
这个问题其实很分裂。
预算紧的时候，你恨不得买最便宜的盒，心想反正也就做几次。
然而便宜之物常常存有代价, 例如批间差距较大, 这周所做的结果与下周所做的不相契合, 当你重复进行实验时, 数据宛如风筝般飘忽不定。
转而看, 价格高昂的盒不见得全然是好的。存在部分大牌的试剂盒, 其价格贵到了离谱的程度, 然而稳定性也就不过如此罢了。
真正值得买的，是那些有第三方评估数据、有文献支持的盒。
别迷信品牌，要信数据。
供应商靠谱吗？
这个很少人提，但真的很重要。
你买了盒，放了大半年，突然要用，发现过期了。
或者你急着用，供应商却说下周三才能发货。
甚至有些供应商，售后电话打不通，技术支撑一问三不知。
所以在进行供应商挑选之际, 要多多去查看他们的库存状况, 以及物流情况, 还有技术支撑的水准。千万别在实验已然开展到一半之时, 出现盒子没了的状况, 否则到那时你即便想哭也根本来不及了。
说到底，怎么选？
没有十全十美的抗体ELISA试剂盒。
然而存在着一种不那么巧妙的办法, 那便是, 首先对于你的样品类型予以确定, 接着对所需的灵敏度进行确认, 之后审视操作流程是不是能够被接受, 最终将价格跟供应商服务进行对比。
这四个步骤走下来，基本不会踩大坑。
剩下的，就是多做预实验，多对比几个盒。
别怕麻烦，怕麻烦的代价是更大的麻烦。
一个小建议
要是你正巧才着手搞ELISA, 花钱预算方面又不是很充裕, 那就能够先购些小包装的去做一些试试看。
别一上来就买大包装的，万一不行，整盒都得扔。
此外, 千万不要忘记查看保存的条件, 存在一些盒子需要四摄氏度的存储要求, 而另有一些则需要零下二十摄氏度的条件, 你家放置物品 的冰箱存储空间充足与否呢?
这些问题，看似小事，但都能影响你的实验进度。
最后
在那个选择试剂盒的事情当中, 这犹如那种寻觅对象的情况, 不存在什么绝对的判断是对或是错, 仅仅存在着是否契合恰当这么一回事。
别盲目跟风，也别一味追求便宜。
找到适合你样品、你预算、你实验室条件的，就是最好的。
倘若下次再去购置抗体ELISA试剂盒之时, 心里要存有个底数, 切莫被那些花哨至极的包装给蒙骗了。
就这样。
