多克隆抗体——这名字听起来挺唬人的。
对刚接触此物的人而言, 其第一反应大体都是: 这又是出自哪个实验室之手的高端且上档次的玩意儿? 实际上, 说白了它乃是由一群B细胞所产出的抗体混合物。留意这个“群”字, 此乃关键所在。
真要说清楚这事儿，得从免疫系统那点破事说起。
为什么动物一打疫苗就能产生一堆抗体？
你往兔子亦或是山羊身上打一针抗原, 它的免疫系统便貌似炸了锅一般。各类B细胞纷纷跑出来, 各自去生产自身的抗体。有的识别抗原的左边部分, 有的识别右边部分, 有的识别中间那块凸起来的部分。
最终, 你从动物血清之中提取出来的, 便是这些杂乱无章、然而却都能够识别同一种抗原的抗体混合物。
对，就是这么糙。
但糙有糙的好。
多克隆抗体到底好在哪？
出活速度快并且价格低廉, 这构成了首要缘由, 一只兔子, 通过注射几次抗原, 在历经几周时间后进行抽血操作, 随后便能够提炼获取数目可观的抗体。那么单克隆又如何呢? 它需要将细胞予以融合, 对克隆展开筛选, 进而对细胞实施培养, 所耗费的精力极大。
还有一个点, 很多人并不清楚, 那就是: 多克隆抗体, 它能够识别, 同一抗原之上的, 多个不一样的表位。
这究竟意味着什么呢? 在进行检测之时, 信号会变得更为强烈。举例来说, 像做ELISA或者Western Blot这种情况, 多克隆抗体往往要比单克隆灵敏许多。
确实存在缺点, 最为突出的毛病乃是特异性不稳定, 不同批次之间会出现偏差, 由于每次免疫动物所产生的抗体谱系均有所不同, 这一情况着实令人颇为头疼。
不过对于基础科研来说，大多数情况下这点问题不算事儿。
实验室为啥宁可用多克隆也不换？
我知晓好些实验室里的经验丰富者, 他们从事实验工作达十几年之久, 在购买抗体时, 只认定多克隆的那种。
问他们为啥？
回答特统一：“够用了。”
真的就是这般简易。进行免疫组化, 开展WB, 实施ELISA, 多克隆抗体在灵敏度方面表现较高, 价格较为便宜, 并且只要不是那种对要求极为严苛的实验所需, 在那微小的批次差异根本不会对结果造成影响。
反而是那些, 在发文章之前, 被审稿人要求去补充实验结果的情况, 并且非要使用单克隆抗体的这般状况, 那才称得上真的是折腾呢。
多克隆抗体怎么选？搜索的时候注意点啥
很多人买抗体的时候会直接搜“多克隆抗体”，然后看价格排序。
这其实不太靠谱。
倘若是打算针对“多克隆抗体 兔源”进行查找, 或者是针对“多克隆抗体 高灵敏度”展开搜索, 或许那样找起来会更精准些。要是进行的是免疫组化相关操作, 那么去搜索“多克隆抗体 IHC 级别”, 效果会好许多。
此外留意查看, 货号后面的标签, 究竟是经过验证的, 还是仅仅保证纯度。存在一些便宜货, 实际上只是粗提物, 所含杂质众多, 使用起来效果欠佳。
真正能够发挥良好效用的多克隆抗体, 皆是具备亲和纯化环节的, 虽说 cost 要更加高昂一些, 然而相较于粗提物而言则要优质许多。
一个被忽略的事实：多克隆抗体的“不完美”其实是种优势
单克隆抗体像一把精准的手术刀，只切一个点。
生物学实验并非做手术, 蛋白于细胞之中, 常常呈现折叠状态、处于被修饰情形、与其他蛋白相互绑定在一起。针对仅识别一个表位的单克隆抗体而言, 有时根本无法辨认出蛋白在天然状态时的模样。
多克隆抗体像一堆钥匙，总有一把能打开锁。
这便是诸多进行蛋白结构分析工作的人, 最终却回归到多克隆抗体的缘由所在。并非表明它具备更好的特性, 而是它与实际情形更为贴近。
说白了，实验是活的东西，不是零件组装。
最后说点掏心窝子的
多克隆抗体此物, 观其外貌似乎极简, 然而实际上其中所蕴含的门道极为繁杂。有些人认为它在纯度方面表现欠佳, 在专一程度上有所欠缺, 在档次层面不够高端, 不过真正精通此领域的人明白, 于特定的某些场景当中它恰恰是最为好用的。
而且价格确实便宜。
要是你才着手做实验, 资金预算有限, 还不想在试剂方面耗费过多不必要的钱财, 那多克隆抗体不失为一个挺好的选择。但这有个前提条件, 就是你必须清楚怎样去挑选, 怎样去运用, 怎样去判别批次间的差异。
实验这东西，有时候真不用一味追求顶级配置，够用就好。
