SET2细胞源于成人急性巨核细胞的那种异常增殖后的产物,它被构建成体外培养模型,这个体外培养模型为探索巨核细胞分化以及增殖机制创造了重要工具,SET2细胞有着稳定的遗传特征,还有可重复的生长特性,它在基础细胞生物学研究领域被广泛运用。
SET2细胞培养条件
SET2细胞的培养,需要特定的培养基配方,一般会采用含有10%胎牛血清的RPMI - 1640基础培养基,温度得控制在37摄氏度,二氧化碳浓度要维持在5%左右,此时细胞呈现悬浮生长状态,每2到3天要进行传代操作,且接种密度需保持在每毫升2×10^5至5×10^5个细胞。
关键步骤是,定期去更换培养基,还要观察细胞形态发生怎样的变化。若是密度过高就将会生出问题,也就是导致营养被耗竭掉,以及代谢废物开始积累起来,进而影响到细胞的活力。要使用倒置显微镜,去监测细胞团块大小如何,以及均匀程度怎样,以此来确保培养体系能够长期稳定地运行下去。
SET2细胞表面标志物
SET2细胞会表达典型的、与巨核细胞相关的抗原,像CD41以及CD61。这些标志物借助流式细胞术来进行检测,藉此用于验证细胞的身份与其纯度。另外,该细胞还呈现出CD34阴性的特征,这表明它处在相对分化的巨核细胞阶段。
便于研究人员区分SET2细胞跟其他血液来源细胞系的是对这些标志物的了解,要留意在多参数分析时刻CD42b的表达水平也很关键,其体现的是细胞朝着成熟巨核细胞分化的潜力,定期检测标志物能够有效地防止因交叉污染而产生的实验误差。
SET2细胞实验应用
药物筛选实验里,SET2细胞常被用于评估小分子化合物针对巨核细胞增殖的抑制成效,采用CCK - 8或MTT法测定细胞活性,进而获得剂量反应曲线,除此之外,该细胞也适宜用于研究细胞周期调控蛋白的表述变化样式。
在基因功能研究范畴内,能够借助慢病毒载体介导的那种过表达或者沉默技术去处理SET2细胞,经过实时定量PCR以及蛋白质印迹法来验证目标基因的表达发生的改变,这样的一种体系为阐释巨核细胞异常增殖的分子机制给予了可靠工具。