上周又扔了一盒。
两千多块钱。
就因为它跑出来的曲线歪得跟心电图似的。
我目不转睛地瞅着那台PCR仪,持续地看了足足四十分钟,屏幕散发的蓝光,致使眼睛变得发酸。
凌晨两点的走廊里,就我一个人。
省钱还是找罪受
隔壁实验室的小张发了条朋友圈:“第四盒了,全是杂带。”
配了一张跑胶图。
烂得连marker都不忍心看。
底下评论清一色的“我们也是”“抱抱”“换吧”。
没人问他要不要帮忙分析方案。
因为大家都懂。
通用型的便宜啊。
单次涉及国产的成本情况,仅为十来块钱,而进口的相关成本,我实在不敢去计算,一旦计算,心脏便承受不了。
但便宜能当饭吃吗?
通用这俩字有多坑
我刚进实验室那会儿也迷信“通用”这俩字。
觉得既然叫通用,那就啥都能干呗。
错。
大错特错。
有一篇文章讲得十分合乎情理——通用型的能够适用的范围确实是广泛的,然而在面对着复杂的样本之际,比较容易出现状况。
灵敏度拼不过专用型。
特异性也得赌运气。
我跑过一个低丰度的样本,足足折腾了三天。
换引物、调程序、重新提模板……
最后换了专用试剂盒,一把过。
那种感觉怎么说呢。
想骂人,但不知道该骂谁。
只能骂自己。
给不懂的人看的选购思路
说实话,这几年踩的坑够出一本书了。
如果你也架不住非得买通用型的,那几点硬指标最好看仔细点。
批次稳定性。
有些批次跑出来漂亮得像教科书,换个批号曲线就歪到姥姥家。
你去打个电话,向厂家询问情况,客服客气得不得了,说道:“亲,质检得出的报告是没有问题的哦。”。
那你告诉我为什么跑不出来。
是我手残?
抗干扰能力也很关键。
你拿去测复杂样本的时候,杂质含量那叫一个高。
好的通用型还能扛一扛。
差的?直接给你摆烂。
性价比就别提了。
国内生产的经一番探寻后单次反应大致在八块至二十五块这个范围,进口的呢……算了,不去讲它了。
逃不过的人性
有一件事我一直没好意思和学弟学妹说。
其实我们越来越依赖“通用”,可能不只是因为它好用。
还因为我们越来越懒。
不愿挨个摸索,不愿试错,只想要现成的。
前阵子实验室搬来一个学弟,啥也没说就拆了一盒新的。
等我看到的时候,缓冲液已经被反复拿了三四次。
我当时就想骂人。
但又没骂出口。
因为我也这么干过。
“通用”这个词,有时候就是在替我们的懒惰买单。
灵敏度的诱惑
翊圣存在一款产品,该产品能够于4重呼吸道检测当中,达成每毫升250拷贝这样的灵敏度。
诺唯赞更猛。
热启动酶配精心优化的缓冲体系,据说是真能到单拷贝的水平。
数字确实漂亮。
但你别上头。
那是实验室的数据。
到你手上呢?
模板的纯度情况,引物的设计方式,退火的温度数值,无论哪一个环节出现问题,都极有可能导致翻车现象的发生。
通用型给你的是一个好底子。
但别指望它帮你填坑。
数据的谎言
我做过的实验里,有一种情况最让人崩溃。
仪器跑完,对照一切正常。
样本全没起线。
然后你开始排查——加样错了?引物没配对?程序设错了?
最后发现,就是试剂盒不行。
那种浪费时间、样本、钱……
却不能怪任何人的感觉。
糟糕透了。
冻了又化
某些品牌说自己的试剂反复冻融十次酶活都不降。
我看了确实佩服。
但——
实验室那扇冰箱门,从早开到晚。
一天来来回回几十次。
谁能保证试剂一直在最佳状态?
有些师兄穷惯了,一管试剂恨不得用半年。
想想真后怕。
聊点国产的
翊圣。
诺唯赞。
全式金。
这几个国产品牌在通用PCR这块算是排得上号的。
翊圣的那款预混液,能够与病原微生物兼容,能够与人源基因组兼容,能够与植物等多种物兼容用于检测,其兼容性着实厉害。
在论坛之上,有人夸赞诺唯赞的Taq Pro,甚至于它能够与日本TOYOBO进行一番较量。
我还听说有款带dUTP防污染的。
以前没在意。
直到有一次整间实验室被气溶胶污染了。
那之后,不管什么试剂,但凡带防污体系的,先加印象分。
几个小建议吧
每次拿到新批次的试剂,先测一次。
用你最熟的那对引物,最好的那批模板。
跑一次看看曲线。
跟上一盒对比。
如果差别大,别犹豫。
退货。
别等样本做完了才发现。
通用的边界在哪
通用型PCR试剂盒到底范围有多广?
说穿了就是一个啥都能干的反应体系。
但——
别迷信“通用”这两个字。
它不等于“适合你所有的场景”。
做低丰度基因的时候,该换专用型还是要换。
通用型像瑞士军刀。
能干的事确实多。
可真要比切菜,它肯定比不过专业菜刀。
最后唠叨两句
PCR试剂盒的全球市场一年上百亿美元。
这数字背后是无数实验室的消耗。
是我们这些半夜还在PCR仪前蹲着的人。
熬着夜,花着钱,赌着试剂盒能不能跑出来。
通用型PCR试剂盒有用吗?
有用。
但别把它当救世主。
真正把实验做出来的,从来不是盒子。
是人。