我盯着显微镜下的SET2细胞，已经整整三个小时了。
甭管为啥, 反正就是觉着它们不太对劲。它们生长速度极快, 快得分分钟让我心里发慌。培养基的颜色, 一开始是樱桃红那般, 之后转变为了橙黄, 而且总是比预先所期望的时间提前六个小时。我本理应感到骄傲的确——巨核细胞白血病细胞, 原本就向来是以增殖能力超强闻名的。但我始终总感觉好像哪儿不太对头。
这种不安，大概每一个养过SET2的人都懂。
到底什么是SET2细胞？
不得不说, 当最初拿到这个细胞系之际, 我查阅了文献, 整整查阅了两天。SET2, 其全称为SET - 2, 它是于1994年从一位成人急性巨核细胞白血病患者的外周血当中建立细胞系的。
有个老外是患者, 他叫啥名字我给忘掉了。那时在他白血病细胞当中检测出一种染色体异位, 即t(9;22)(q34;q11), 这便是我们平常所说的费城染色体。此物存在于慢性粒细胞白血病里是比较常见的, 然而出现在巨核细胞白血病里, 就显得有些少见了。
所以, SET2细胞, 从本质层面来讲, 是单单携带着那极具特异性的BCR - ABL这类融合基因的, 属于是以巨核细胞系为基础的, 一种作为特定白血病表征的细胞株。
听闻起来是不是甚为曲折, 简而言之, 它属于一个工具。专注于探究某些特定类型白血病的工具, 尤其是那种牵连到费城染色体的巨核细胞白血病的工具, 是进行研究的标准工具。在全球范畴之内的实验室, 只要是从事这个研究方向的, 基本上都是必须要运用它的。
这个细胞为什么这么难伺候？
我得坦白说。我刚开始养它的时候，差点崩溃。
SET2这个东西, 着实娇气。它和别的细胞系不一样, 你给别的细胞系添加一点RPMI1640再加上10%胎牛血清, 它就能迅猛生长。它做不到。它需要条件培养基, 也就是别的细胞培养过一段时间、释放出一堆生长因子之后的那种废弃培养基。
听闻起来略微有些令人作呕? 实验室当中的人员都将这称谓叫作“conditioned medium”。要是去购买的话, 价格贵得吓人, 要是自己动手制作的话, 你必须先去养护一株另外的细胞, 像是人膀胱癌细胞5637亦或是人胶质瘤细胞U87MG, 收取它们的上清部分, 进行过滤, 接着依照一定的比例添加到SET2的培养基之中。
并且它生长的速度迟缓。着实很慢。进行一次传代, 需要三天至五天方可达成。我曾目睹一位师兄, 培育了两个月, 在进行冻存操作时发觉细胞根本就没怎么实现增殖, 愤怒得差点将液氮罐给砸坏了。
传代多了，它还纯吗？
这个问题，其实才是我想说的重点。
每个曾养过SET2的人, 心里都存有一根刺, 就是它到底还纯不纯的这般疑惑。这根刺, 名为——它到底还纯不纯?
这听着或许有点专业, 不过我尝试说得更为通俗些。细胞系并非始终如一, 在于体外进行传代的进程里, 细胞会出现变异。存在一些亚群生长速度快, 还有一些亚群死亡速度快, 时间一长, 你手中的那瓶细胞, 说不定跟刚开始建系的时候的SET2, 已然存在极大差异。
更麻烦的是，有时候别的细胞会混进去。
我知晓有一个实验室, 他们曾进行了一次基因检测, 检测时发现手中所拥有的SET2细胞, 竟然存在一部分呈现出髓系单核细胞系才会具备的标记。也就是说, 该SET2细胞很有可能早已被其他细胞给污染了。如此情形, 在细胞培养的这个世界当中, 并非属于罕见的情况。
所以, 要是你所拿到的是SET2, 并且传代已经超过了二十代, 那么我建议你还是打一个问号。
冻存复苏，真的是门手艺活
说句实话，我从来不觉得冻存复苏是什么高深技术。
但SET2不一样。
它进行冻存之际, 需采用百分之九十的胎牛血清与百分之十的二甲基亚砜。二甲基亚砜存有毒性, 但要是不使用它, 细胞于冷冻进程中会被冰晶扎破。此比例是存在讲究的, 多了不可以, 少了同样不可以。
进一步而言, 在复苏阶段, 解冻的速度必须要快, 然而添加培养基的速度却得慢。要是你一下子就把培养基全部倾倒进去, 渗透压会瞬间发生变化，细胞将会直接呈现出裂解的状态给你看。我曾目睹过一位师妹的情况, 在复苏时她的手颤抖了一下, 结果细胞全部死亡了。当时她当场就哭了。
并且, 被冻存的密度最好管控在对于每毫升而言是五乘以十的六次方的程度。要是过于稀薄了, 当复苏之后便无法存活；要是过于紧密了, 由于冻存液不足够, 同样也无法存活。
这些都是血泪教训。
它到底能帮我们发现什么？
说到这个，我得承认，SET2确实是有用的。
由于其携带BCR - ABL融合基因, 它进而成为了研究酪氨酸激酶抑制剂——也就是伊马替尼那种药物——的绝佳模型, 你运用不同浓度的伊马替尼对它加以处理, 观察它何时死亡, 以怎样的方式死亡在, 制作一条剂量反应曲线, 如此便能初步判断药物效果。
有研究者将其用于巨核细胞分化的研究, SET2在体外能够被诱导, 进而表达一些巨核细胞的表面标记, 诸如CD41、CD6l, 若你想弄明白某个基因对巨核细胞发育产生的影响, SET2便是一个挺好的实验对象。
但终究而言, 它仅仅是模型, 并非人体，它于培养瓶里所见到的事物, 在抵达病人身上之时, 或许全然是另外一番情形。
你有没有想过，它可能已经不是你想要的SET2了？
可能我说的话有点负能量。
但我真的觉得，每一个养SET2的人，都应该定期做一次鉴定。
起码检测一番 BCR - ABL 融合基因是否仍存在, 进行短串联重复序列的检测, 瞧瞧细胞有无遭受交叉污染, 开展支原体的检测这事。这些检测费用都不低啰, 然而相较于你耗费好几个月时光做了一大摞实验, 最终却发觉细胞根本并非 SET2 而言, 这些检测所需的费用, 着实不算贵呐。
我一直记得, 有个老教授跟我说过一句话, 他讲, 你所做的实验, 从本质上来说是在与细胞进行对话, 只不过要是那个细胞欺骗了你, 那你得出的所有结论便全都是假的。
我不知道你现在手里的那瓶SET2，是不是在骗你。
但如果你也感到一丝不安，也许，你该查一查了。
毕竟养了十年的细胞系，到底靠不靠谱，这件事，谁也说不准。
