这管细胞到底是个啥?
说实在的, 当我头一回瞅见“SET2成人急性巨核细胞白血病细胞”这般完整的名称之际, 我的脑袋处于发懵的状态。
英文混着中文凑成一堆, 好似一串密码。然而, 要是你跟我一样从事血液病基础研究工作, 你便会晓得, 这东西实际上是用于研究巨核细胞白血病以及血小板生成异常情况的一个“宝贝”。
它并非普通细胞, 它源自一位患有急性巨核细胞白血病(AMKL)的患者身上, 它能够稳定地进行传代, 它可以被用来模拟疾病状态。简单来讲, 它是可以在体外让你“复刻”病人体内情形的一种工具。
为什么你非得买它?
你可能已经在实验室里折腾了好几个月。
居然养了好些原代细胞, 结果它们在仅仅三天之后就死得明明白白给你瞧。又或者使用了别的白血病细胞系, 像是那叫K562、HEL的, 然而却发觉它们压根儿就不呈现巨核细胞的某些至关重要的标志物。
这时候你就需要SET2了。
它最为厉害之处在于, 它是确实从“巨核细胞系”而来的, 并非那种只是“看似相像”的替代物。它能够呈现出 CD41、CD61 这些属于巨核细胞独有的表面抗原, 并且还能够对 TPO(促血小板生成素)产生响应。
若你打算研究巨核细胞分化遭遇阻碍? 想要进行筛药? 意欲弄明白某个基因突变致使血小板出现异常? 那么SET2便是其中那个“合适的对象”。
养它需要注意什么?
别以为买了就能随便养。这玩意儿娇气得很。
需使用RPMI - 1640作为培养基, 搭配10%至20%的胎牛血清, 并且还要添加一些青霉素 - 链霉素以防止污染, 设置培养箱成为37°C、5% CO2, 湿度要足够。
它偏好以悬浮的状态生长, 然而偶尔会出现轻微贴附于壁面的情况, 此时无需惊慌, 只需轻轻地吹打一番便能够使之脱落下来。其传代的比例通常处于1比2至1比3的范围之内, 并且每隔两三天便需要更换一次培养液。
那个, 在进行冻存操作之际, 得使用百分之九十的血清再加上百分之十的二甲基亚砜, 采用缓慢冷冻快速融化的方式, 这可是铁定的规则哟。
若问我缘何知晓, 那是因我往昔亦因冻存方式欠妥, 致使一整批细胞受损, 心疼到连续三日未曾入眠, 难以成眠, 故而晓得。
它到底能帮我做什么实验?
这一问题问得相当不错。你耗费高昂价格将之买回来, 可不是要让它在瓶子里头生长的。
药物筛选, 你若想知晓某一化合物是否能够抑制白血病细胞的增殖, 那就将SET2种入96孔板之中, 进行梯度给药操作, 之后采用CCK - 8进行检测读取, 如此一来数据便可得之。
你打算针对基因功能展开研究探究, 是不是想把某个特定基因给敲除掉, 进而查看该基因是否属于致使巨核细胞白血病产生的关键因素所在呢? 运用CRISPR-Cas9技术在名为SET2的对象里实施基因敲除操作, 而后借助流式检测手段去观察分化标志物所产生情况的变化。
进行机制探索时, 信号通路方面, 转录调控相关, 凋亡以及自噬等, 针对你所能想到的细胞生物学实验, 它差不多都能够予以配合。
不过有一点你必须记着, 它仅仅是一个细胞系, 没办法全然代表病人体内的繁杂环境。结论务必要审慎, 最好采用原代细胞或者动物模型去验证一番。
你是不是也担心过这些问题?
“这个细胞会不会被污染?”
没问题。特别是支原体污染, 简直防不胜防。提议每个月运用PCR试剂盒进行一次检测, 千万别偷懒哦。
“它传代多了会不会变异?”
有具备可能性, 建议你对传代的次数予以控制, 不要超出20代, 在买回来之后先进行一批扩增然后予以冻存, 每次取出一支新的来进行复苏。
“我买的是别人做过的实验剩下的细胞,能行吗?”
要是来源指向不明的细胞, 最好就此作罢不行, 因为其状态、标志物表达以及遗传背景都极有可能发生了改变, 如此一来, 即便开展了实验最终得出的结果恐怕也难以令人信服, 做了也无非是徒劳无功白费力气罢了。
一点真心话
写到这里,我突然想起自己刚进实验室那会儿。
导师递给我一管细胞, 讲“拿去养”, 我内心慌得不行, 连培养基都险些加错。之后渐渐摸索, 瓶子摔过、菌染过、无数细胞被冻死, 才最终学会怎样伺候这些“祖宗”。
SET2并非是那种所谓的“万能细胞”, 它具备自身独特的性子以及存在局限性。然而要是你有对巨核细胞白血病展开研究的需求, 那么它的确是一个无法避开的工具。
你不能寄希望于它去处理每一个问题 , 也不要由于它存在麻烦就选择舍弃。自然科学的情形便是如此 , 逐个去抠那些小细节 , 逐步朝着事实的方向靠近。
你手里的那管细胞,可能就是下一个发现的起点。