其实第一次养原代细胞的时候，我差点想摔培养皿。
这不是夸张, 那种感受如同你费尽艰辛搭建了一个鸟窝, 然而鸟根本就不飞进去, 细胞悬液看起来挺多的, 在显微镜下也呈现出亮晶晶的样子, 可是到了第二天一看, 有的死了, 有的飘着, 有的染菌了, 整个培养皿仿佛处于被轰炸过的状态。
接下来我才弄明白, 并非是我未曾付出努力, 而是我压根就不清楚原代细胞的那些难以捉摸的性子了。
原代细胞到底是个什么物种
很多人以为细胞就是细胞，养起来都一样。大错特错。
待在培养箱中好些阵子的传代系细胞并非原代细胞, 那种细胞早就被驯化变得很是驯服，就如同实验室里极听话、特别乖巧且给点食物就会生长的狗；相异于这种驯化了的传代系细胞, 原代细胞刚从组织里进行割离, 仍然携带着生物体的初始记忆, 它仍旧好似身处于活生生的某个器官之中。
你把它放到塑料皿里，它觉得被绑架了。
由此可见, 在第一周的时候, 它会出现应激反应, 它会面临死亡状况, 它会拒绝生长态势。这属于正常情形, 并非是你操作存在问题。
为什么你的细胞总是活不过三天
我见过太多人，包括当年的我，第一天就把细胞折腾得半死。
消化的时间太过长, 细胞膜破裂了。离心的转速太高, 细胞直接碎掉。培养基不对, 细胞处f饥饿状态。污染了, 那就更不用说了, 得直接重新开始。
那次最狠，有个师兄养小鼠肝细胞, 连续三个批次, 全都染菌了。他觉得是超净台出问题, 换了台子, 又换了枪头, 甚至连手套品牌都换了, 仍然染菌。最后发觉是老细胞的胰酶被污染了, 可他一直舍不得扔掉。
原代细胞, 真的是这般矫情, 随便哪一个环节, 只要稍微出现岔子, 它便一定会耗用自身的死亡, 进而向你作出告知。
养原代细胞到底需要多细心
你可能听说过一句话：原代细胞是用钱堆出来的。
不对，是用耐心堆出来的。
存在这样一位我结识的从事神经细胞研究方面的老师, 她讲她从来都是不会将细胞处在的位置放置于培养箱最里面的地方。这是为何呢? 原因在于当门开启或者关闭的那一瞬间, 处于最里面位置的温度出现的波动程度为最大。仅仅是为了这零点几度的温度差, 她宁可每一次都弯下腰去拿放置在最外层的用来承载细胞的皿。
还有一位从事心肌细胞研究的男士, 每次在进行培养液更换操作之前, 都会将培养基放置于手掌心捂上五分钟, 以此确保其温度与人体体温保持一致。他表示那些细胞刚刚从心脏部位取出, 对于温度极其敏感之程度就如同刚刚诞生的婴儿一般。
听起来矫情吗？但人家的细胞确实能活两个月。
为什么你的细胞老是贴壁不牢
这个问题问的人最多。
贴壁之能力, 原代细胞本就少于其传代细胞不少。特别是类似神经细胞、心肌细胞等, 源于某些特殊组织的那些, 生来即在黏于塑料一事上, 有着不喜好之特性。
你可能会想，那我铺点胶原蛋白不就行了？
能行, 然而铺了并不意味着就能够贴好。关键之处在于铺的时机, 在于铺的浓度, 在于铺完之后是否需要风干, 在于风干多长时间, 这些细节才是决定成败的所在。好多人贪图省事, 铺完之后直接添加细胞, 结果胶原层还没有吸附好, 细胞一进去就被冲散开了。
污染这件事真的是玄学吗
说实话，污染有时候还真是玄学。
今儿操作环节明明完全相同, 并无异常；来日却长出了菌。何况原代细胞因欠缺抗生素的适应进程, 相较于传代细胞而已讲, 其实更易于被细菌污染而染菌。
但先别忙着责怪自己, 很多人的污染问题存在于组织本身比如从小鼠肠黏膜获取细胞这个地方原本细菌就多无论你怎样消毒都无法彻底杀灭有时候并非是你的责任而是组织自身携带的细菌在培养皿中肆意狂欢。
饿死的细胞比撑死的多
你有没有发现，原代细胞特别容易饿？
因其才从组织之中出来, 代谢模式尚未转换过来, 它并不知晓自身当下需依赖培养基里的养分。部分细胞甚至不会主动去吸收营养, 它仍在等待体内那般源源不断的血液供应。
因此, 好多人所犯的错误乃是换液过于频繁, 你觉得给予它新鲜的便会是好的, 实际上, 每一次换液都在扰乱它好不容易才构建起来的微环境, 它在那儿缓缓地适应, 你一下子全给换掉；于是, 它又不得不重新来过。
有些细胞，尤其是原代肝细胞，换完液就死给你看。
这玩意儿到底值不值得养
说句大实话，不值得。
要是你唯独只是想着毕业而已, 假使仅仅只是想着发表一篇文章而已, 实打实的千万别去触碰原代细胞。它是特别难以伺候照料的, 得出结果的周期是极为漫长之甚的, 遭遇失败的几率是相当之高那般的。一种传代细胞系仅仅三天便能够得出的数据, 原代细胞兴许得费尽周折折腾上整整一个月。
但我见过真正热爱这个的人，他们不觉得苦。
有个从事心肌细胞电生理研究的朋友, 每日他得在显微镜跟前守着细胞瞧, 瞧它有无按规律跳动。他讲那种感受, 仿若在守护一颗微小的心脏。一天他的细胞持续跳动了足足两个月, 他兴奋得宴请全实验室的人吃饭。
你说他疯了吗？可能吧。
不过, 那种把细胞从死亡边缘拉扯回来的感觉, 只有养过原代细胞的人才能体会到, 看着它在培养皿里缓缓舒展开来。
最后说点啥
养细胞方面我绝非被称作高手的那种人, 我曾致使数不清的细胞死去, 让无数个培养皿掉落摔碎, 有那么一阵子, 甚至畏惧去打开培养箱, 原因在于总能瞧见一皿中飘逸着众多死去的细胞。
但若你此刻正身处这一阶段, 我欲告知你, 并非是你存在问题, 而是此物究其本来便是困难的。
别匆忙地对自己产生怀疑, 也万万勿急着把培养皿丢弃。换一种方式去进行尝试, 接着再度尝试一回, 或许改天它就实现贴壁了。
