公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
商品属性：
| 产品名称 |
规格 |
货号 |
| 第三代耐热逆转录酶（无甘油版） |
6ku |
P-PR2387 |
| 第三代耐热逆转录酶（无甘油版） |
12ku |
P-PR2387 |
| 第三代耐热逆转录酶（无甘油版） |
300ku |
P-PR2387 |
描述：
Hifair® III Reverse Transcriptase 是在 Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶，与 Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 相比，其热稳定性大幅度提高，可耐受高达 65℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的 RNA 模板的逆转录。同时， 该酶增强了与模板的亲和力，适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase 合成全长 cDNA 的能力也有了提升，可扩增长达 19.8 kb 的 cDNA 。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free 第三代耐热逆转录酶（无甘油版）可用于制备冻干制剂、可冻干 RT-LAMP 试剂等。
组分
| 编号 |
组分 |
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产品编号/规格 |
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P-PR2387 (6 KU) |
P-PR2387 (12 KU) |
P-PR2387 (300 KU) |
| 11 |
Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL) |
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10ul |
20ul
|
500ul
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储存：
冰袋运输。4℃保存，效期 6 个月。
单位定义：
以 Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物，在 37℃ , 10 min 内，将 1 nmol 的 dTTP 掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为 1个活性单位（U）。
参考操作步骤
1. 体系配置：
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组分
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组分
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使用量
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13840-A
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10×Bst Buffer
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2.5 µL
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13840-C
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100 mmol/LMgSO4
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2 µL
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dNTP Mix (100 mmol/L)
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dNTP Mix (100 mmol/L)
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3.5 µL
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dUTP Mix (100 mmol/L)（可选）
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dUTP Mix (100 mmol/L)（可选）
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0.35 µL
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11297
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Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)
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0.1 µL
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10703
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Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)
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0.2 µL
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13839（可选）
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Heat Labile UDG (200 U/µL)（可选）
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0.005 µL
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10×Primersa
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10×Primers
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2 µL
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13840-Bb
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Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)
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0.5 µL
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RNase free ddH2O
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RNase free ddH2O
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To 25 µL
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【注】：
a. 10×Primers：16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each；引物组的比例也可以进行适当的调整。
b. 可根据实验具体情况来调整用量。
2. 反应程序设置
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温度
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时间
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作用
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37℃
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2 min
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消化
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65℃
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30-60 mina
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逆转录和恒温扩增
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85℃
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10 min
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灭活
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【注】：
a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光， 1 min 采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为 13841 的染料，通道选择 SYBR ，1 min 采集一次荧光。
3. 其它注意事项：
请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用耗材均需保证 RNase free ，以防止 RNase 污染。
2. 所有操作均应在冰上进行，防止 RNA 降解。
3. 为保证高效率逆转录，建议使用高质量的 RNA 样本。
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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